PCR Guru (На Русском Языке - перевод автора)

Лабораторное пособие для начинающих и профессионалов:

Tools, Tips, Optimization and Troubleshooting

Эта книга была написана с целью обеспечения как начинающих, так и опытных исследователей в области молекулярной биологии удобным инструментом и рекомендациями для понимания основ ПЦР, изучения опыта других исследователей и challenging проблем, связанных с постановкой и оптимизацией ПЦР.

Это руководство не обеспечивает читателей подробностями теории ПЦР и прикладными аспектами этой техники. Поскольку это является лабораторным руководством, то основное внимание здесь уделяется на технических аспектах использования ПЦР как инструмента в молекулярно-биологических лабораториях и issues описаны в "лабораторных терминах", что делает данную книгу более понятной для конечных пользователей.

Главы, посвященные стратегии общей оптимизации и устранения проблем, это тщательно детализированное руководство для обращения при специфических проблемах ПЦР; представленные советы и специальные приемы изучались и развивались в течение многолетнего опыта использования ПЦР и различных способов его применения; несколько специальных случаев использования ПЦР; и приложения с протоколами и другой полезной информацией связанной с ПЦР делают эту книгу практическим справочником, который могут успешно использовать все молекулярно-биологические лаборатории.

Содержание:

Предисловие
Глава 1: Введение   
1.1.  Немного из истории
1.2.  Что такое ПЦР?
1.3.  Компоненты ПЦР
1.4.  Экспоненциальная природа ПЦР
1.5.  Популярность ПЦР
Глава 2: Методика
2.1.  Конструирование праймеров
2.2.  Постановка стандартной ПЦР
2.3.  Контроль
2.4.  Параметры циклирования
Глава 3: Навыки успешного ПЦР
Глава 4: Проблемы и их устранение
4.1 Правила оптимизации
4.2 Стратегия общей оптимизации
4.2.1.  Градиент температуры отжига
4.2.2.  Титрование ионов Mg++
4.2.3.  Горячий старт
4.2.4.  Touchdown Посадка
4.2.5.  Присадки
4.3 Разрешение специфических проблем
4.3.1.  Класс 1: Нет полос на электрофорезе.
4.3.2.  Класс 2: На электрофорезе видно стразу много разных полос.
4.3.3.  Класс 3: Наблюдается шлейф на электрофорезе.
4.3.4.  Класс 4: Слабая амплификация (низкий выход ампликонов).
4.3.5.  Класс 5: На электрофорезе видны полосы в контроле.
4.3.6.  Другие классы проблем.
Глава 5: Советы
Глава 6: Особые случаи применения
Долгий-ПЦР
RAPD-ПЦР
Мультиплексный ПЦР
Приложение A: Протокол проведения электрофореза в агарозном геле
Приложение B: Окрашивание ДНК-гелей серебром
Приложение C: Протокол микровыделения плазмидной ДНК
Приложение D: Протокол Рестрикционного Анализа
Приложение E: Протокол установления концентрации ДНК с использованием Hoechst 33258
Приложение F: Разные Формулы
Приложение G: Праймеры для общих промоторов, сигнальных и housekeeping генов
Приложение H: Пептидные метки
Приложение I: Термостабильные ДНК полимеразы
Приложение J: Пример ведения ежедневного ПЦР протокола
Приложение K: Основные буферы и растворы
Приложение L: Полезные цифры
Полезные интернет-ссылки
Список иллюстранций
Глоссарий (Термины и Аббревиатуры)
Индекс

Polymerase Chain Reaction (PCR) Animation

Polymerase Chain Reaction (PCR) Movie

Dideoxy Termination (Sanger) Sequencing Method Movie

In Vitro Site-Directed Mutagenesis Movie

PCR and Its Applications Presentation